抗體elisa檢測試劑盒主要用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體。是ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。
采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬elisa試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
一、儲存與運(yùn)輸注意事項(xiàng)
整套試劑盒運(yùn)輸全程冷鏈2～8℃，禁止暴曬、高溫運(yùn)輸；到貨后立即轉(zhuǎn)入冰箱冷藏，嚴(yán)禁室溫長時(shí)間放置。
未開封試劑盒2～8℃避光保存；HRP酶結(jié)合物、TMB底物嚴(yán)禁冷凍結(jié)冰，結(jié)冰會導(dǎo)致酶蛋白不可逆失活，顯色極弱或無顯色。
凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后必須分裝小管-20℃凍存，反復(fù)凍融不超過3次，多次凍融蛋白降解，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性變差。
拆開鋁箔袋剩余酶標(biāo)板，必須放入新干燥劑、封口扎緊，裸露存放會造成包被抗體受潮脫落，背景值異常升高。
所有液體試劑擰緊瓶蓋存放，防止揮發(fā)、氧化、細(xì)菌污染；不同批號試劑盒試劑嚴(yán)禁混用。
試劑盒不可與強(qiáng)酸、有機(jī)溶劑、消毒劑同冰箱存放，揮發(fā)性氣體會破壞抗原抗體活性。
二、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備注意事項(xiàng)
所有試劑提前從冰箱取出，室溫平衡20～30分鐘再開蓋，避免瓶內(nèi)冷凝水稀釋試劑濃度，造成結(jié)果偏差。
濃縮洗滌液低溫出現(xiàn)鹽結(jié)晶屬于正常，37℃水浴加熱至完q溶解、混勻后再稀釋使用；出現(xiàn)絮狀渾濁直接丟棄。
配制工作液（酶結(jié)合物工作液、樣本稀釋液）現(xiàn)配現(xiàn)用，稀釋后的酶工作液不可長期冷藏留存，72小時(shí)內(nèi)用完。
樣本處理規(guī)范：血清、血漿避免溶血、高脂、黃疸樣本；渾濁樣本建議離心取上清，雜質(zhì)會造成非特異性吸附，背景偏高；樣本短期2～8℃存放，長期-20℃凍存，避免反復(fù)凍融。
提前規(guī)劃孔位，設(shè)置空白孔、陰性對照、陽性對照、標(biāo)準(zhǔn)品梯度，不可省略對照，否則無法判斷實(shí)驗(yàn)是否有效。
移液槍提前校準(zhǔn)，配套一次性無菌槍頭，每換一種液體必須更換槍頭，杜絕交叉污染。
實(shí)驗(yàn)臺面保持潔凈干燥，避免洗滌劑、酒精濺入酶標(biāo)孔。
三、加樣操作關(guān)鍵注意事項(xiàng)
加樣時(shí)槍頭貼孔壁緩慢加注，不要直沖孔底，防止產(chǎn)生氣泡；氣泡會阻斷抗原抗體結(jié)合，讀數(shù)偏低。
標(biāo)準(zhǔn)品、樣本、酶結(jié)合物加樣順序統(tǒng)一，加樣全程控制在10分鐘內(nèi)完成，減少孔間孵育時(shí)間差，保證重復(fù)性。
避免液體加到孔壁上方、孔外，殘留液體干燥后會引發(fā)邊緣效應(yīng)，周邊孔數(shù)值偏高。
不要產(chǎn)生交叉濺液，加樣完成輕拍板側(cè)去除氣泡，不可劇烈震蕩酶標(biāo)板。
四、孵育過程注意事項(xiàng)
孵育溫度嚴(yán)格按照說明書（多為37℃），水浴孵育需用濕盒，孔板加蓋封板膜，防止液體蒸發(fā)濃縮，蒸發(fā)會大幅抬高背景。
封板膜一次性使用，不可重復(fù)復(fù)用；孵育時(shí)保證膜完q貼緊，無漏氣縫隙。
孵育時(shí)間精準(zhǔn)把控，超時(shí)孵育會非特異性結(jié)合加重，背景升高；時(shí)間不足則顯色偏低，靈敏度下降。
孵育環(huán)境避光，TMB底物遇光易氧化，顯色步驟全程減少光照。
五、洗板核心注意事項(xiàng)（決定低背景關(guān)鍵）
洗板是ELISA最容易出錯(cuò)步驟，洗板次數(shù)、浸泡時(shí)間嚴(yán)格遵循說明書，少洗會殘留未結(jié)合雜蛋白，背景飆升。
每孔加滿洗滌液，浸泡30秒后拍干；拍干用干凈吸水紙，每洗一次更換吸水區(qū)域，避免孔間殘留液體交叉污染。
洗板機(jī)洗板需檢查管路無堵塞，洗滌液稀釋比例準(zhǔn)確；手工洗板力度均勻，不可用力甩干導(dǎo)致孔內(nèi)液體交叉串孔。
洗板后孔內(nèi)不可殘留洗滌液，殘留稀釋后續(xù)顯色體系，OD值整體偏低。
六、TMB顯色與終止判讀注意事項(xiàng)
TMB底物液避光操作，A、B液等量混勻后立即使用，配制好的底物工作液不可久放，見藍(lán)即失效。
顯色時(shí)間統(tǒng)一，避光恒溫孵育，肉眼可見梯度藍(lán)色即可終止；各孔顯色時(shí)長保持一致，不要單孔提前終止。
終止液為稀硫酸強(qiáng)酸，加液順序和底物添加順序保持一致，防止先加終止液的孔反應(yīng)提前停止，梯度紊亂。
終止后10分鐘內(nèi)完成酶標(biāo)儀讀數(shù)，放置過久顏色會發(fā)生變化，OD值漂移。
酶標(biāo)儀提前預(yù)熱，設(shè)置對應(yīng)檢測波長（450nm，部分配套630nm參比波長），空白孔調(diào)零后再讀取數(shù)值。
七、實(shí)驗(yàn)污染與交叉污染防控
陽性樣本、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品最后加樣，防止濺液污染陰性孔、空白孔。
廢液單獨(dú)收集，不可倒回試劑瓶；槍頭一次性使用，禁止反復(fù)吸打試劑瓶內(nèi)液體。
實(shí)驗(yàn)完畢酶標(biāo)板不可重復(fù)使用，包被孔內(nèi)抗原抗體結(jié)合不可逆，復(fù)用完q失效。
手套、口罩全程佩戴，手上油脂、皮屑接觸孔板會造成非特異性吸附。
八、安全操作注意事項(xiàng)
終止液含硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、眼睛；若不慎接觸，大量流動清水持續(xù)沖洗10分鐘，必要時(shí)就醫(yī)。
試劑盒含生物蛋白原料，有潛在致敏性，皮膚破損避免直接接觸試劑。
實(shí)驗(yàn)廢液、廢棄板條屬于生物實(shí)驗(yàn)廢棄物，不可直接倒入下水道，按實(shí)驗(yàn)室生物垃圾規(guī)范滅菌處理。
避免底物、酶結(jié)合物接觸金屬容器，金屬離子會催化TMB提前氧化。
九、試劑失效判定與禁用情況
出現(xiàn)以下情況試劑盒不可使用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果無效：
HRP酶結(jié)合物渾濁、出現(xiàn)沉淀；TMB底物提前變藍(lán)；
復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品分層、渾濁、有異味；
洗滌液大量絮狀沉淀；
未孵育僅加底物就明顯顯色；
陽性對照OD值極低、陰性對照數(shù)值接近陽性，無明顯梯度區(qū)分。
